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PVDF轉(zhuǎn)印膜的使用技巧/2
日期：2022-08-16

PVDF轉(zhuǎn)印膜的孔徑怎么選？

 

一旦轉(zhuǎn)印膜被浸濕，蛋白結(jié)合可通過蛋白與膜的接觸而實(shí)現(xiàn)。由于蛋白與膜的結(jié)合貫穿整個(gè)膜的厚度（深度），結(jié)合能力是由孔的內(nèi)部表面積來決定的。0.2um PVDF轉(zhuǎn)印膜內(nèi)部表面積大約是0.45um PVDF轉(zhuǎn)印膜的三倍，使其吸附能力更高。

 

從下圖實(shí)驗(yàn)中，可以看出，20KD以下蛋白選用0.2um PVDF轉(zhuǎn)印膜, 20KD以上蛋白選用0.45um 轉(zhuǎn)印PVDF膜。


PVDF.jpg

 

圖： 延長電轉(zhuǎn)時(shí)間時(shí)0.45um PVDF轉(zhuǎn)印膜和0.2um PVDF轉(zhuǎn)印膜結(jié)合蛋白的效果。分子量標(biāo)準(zhǔn)品（第1、3、5、7泳道）和小牛肝裂解液（第2、4、6、8泳道）通過槽轉(zhuǎn)印法轉(zhuǎn)移到0.45um PVDF轉(zhuǎn)印膜和0.2um PVDF轉(zhuǎn)印膜，并用考馬斯亮藍(lán)染色。在第一張轉(zhuǎn)印膜后再放一張0.2um PVDF轉(zhuǎn)印膜以捕獲穿過的蛋白。（第5和6泳道在0.45umPVDF后面；第7和8泳在0.2um PVDF后面。即第三張膜是放在第一和第二張膜的后面)


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